引言
RA原位杂交技术（I Siu Hybridizaio，ISH）是一种用于检测组织或细胞中特定核酸序列的方法。通过将标记的核酸探针与样本中的目标DA或RA互相杂交，ISH可以在细胞或组织级别上定位特定基因或RA分子的位置。该技术在研究基因表达、基因定位和细胞分化等领域中得到广泛应用。
技术原理
RAscope是一项新颖的用于检测位于完整细胞中目标RA的原位杂交（I Siu Hybridizaio，ISH）检测技术。该技术主要包括组织预处理、探针杂交、信号扩增、图像观察分析等操作步骤，可同时检测多个靶分子以及分析不同类型细胞中基因表达信息与形态学分布的关系。RAscope技术以其能放大特异性信号而非噪音信号的专利探针引物设计方法，代表了RA原位杂交（ISH）领域一项重大进步。
实验流程
1. 组织预处理：首先对组织样本进行固定和脱水处理，然后用RAscope预处理试剂盒处理载玻片上固定好的组织或细胞，暴露目标RA。
2. 探针杂交：将地高辛标记的反义RA探针与切片进行杂交，从而原位显示RA的表达部位和相对丰度。
3. 信号扩增：使用RAscope信号扩增系统对探针杂交信号进行放大，以提高检测灵敏度。
4. 图像观察分析：通过荧光显微镜观察并分析杂交信号，确定目标RA在组织中的分布和表达水平。
应用实例
RAscope技术在肿瘤病理学中的应用非常广泛。例如，在胃癌PD1, PDL1表达分析中，利用RAscope原位杂交技术检测了255例胃癌中PD1, PDL1 mRA表达水平，并与免疫组化EVisio法检测的蛋白表达进行了对比，验证了其在检测低丰度和罕见mRA表达方面的有效性。
RAscope原位杂交技术作为一种先进的分子生物学工具，已经在基因表达谱的研究、肿瘤病理学诊断等多个领域得到了广泛应用。其独特的信号放大机制和高灵敏度使其成为研究基因表达和疾病诊断的重要手段。未来，随着技术的不断改进和应用范围的扩大，RAscope有望在更多的生物医学研究中发挥重要作用。
